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細胞凍存過程
日期：2025-06-07 02:52
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摘要：細胞凍存過程：
1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2.取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用PBS清洗。
3.去除PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4.離心1000rpm，5min；
5.去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的終密度為5×106/ml～1×107/ml；
6.將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7.在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8.凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/min；當溫度達-25℃以下時，可增...
細胞凍存過程：
1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2.取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用PBS清洗。
3.去除PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4.離心1000rpm，5min；
5.去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的終密度為5×106/ml～1×107/ml；
6.將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7.在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8.凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。
1.配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養液；
2.取對數生長期的細胞，去除舊培養液，用PBS清洗。
3.去除PBS，加入適量胰蛋白酶（覆蓋培養皿表面）把單層生長的細胞消化下來；
4.離心1000rpm，5min；
5.去除胰蛋白酶，加入適量配制好的凍存培養液，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，計數，調節凍存液中細胞的終密度為5×106/ml～1×107/ml；
6.將細胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；
7.在凍存管上標明細胞的名稱，凍存時間及操作者；
8.凍存：標準的凍存程序為降溫速率-1～-2℃/min；當溫度達-25℃以下時，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內。